PCR tshuab | Koj puas to taub tiag?

Nobel Prize-winning PCR thev naus laus zis

Xyoo 1993, tus kws tshawb fawb Asmeskas Mulis tau txais Nobel nqi zog hauv Chemistry, thiab nws qhov kev ua tiav yog kev tsim kho ntawm PCR thev naus laus zis.Cov khawv koob ntawm PCR thev naus laus zis yog nyob rau hauv cov yam ntxwv hauv qab no: Ua ntej, tus nqi ntawm DNA yuav tsum tau amplified yog heev me me, thiab theoretically ib molecule yuav siv tau rau amplification;Secondly, lub amplification efficiency yog siab, thiab tus nqi ntawm lub hom phiaj gene yog exponential.Amplification, ntau dua 10 lab zaug hauv ob peb teev.Tam sim no PCR ntsuas tau siv dav hauv kev tshawb fawb txog lub neej thiab ntau yam.

Cov qauv sib txawv thiab cov chaw tsim khoom ntawm thermal cyclers tuaj yeem pom qhov txawv txav thiab rov ua dua.Cov kev sib txawv no cuam tshuam tsis yog PCR kev ua tau zoo xwb tab sis kuj yog qhov tseeb thiab sib xws ntawm cov ntaub ntawv tau txais.Kev nkag siab txog PCR tshuab nta tuaj yeem pab peb ua kom tiav ntawm peb cov kev sim.

Cua sov module

Qhov tseeb ntawm qhov ntsuas kub ntawm lub thermal cycler tuaj yeem txiav txim siab rau kev ua tiav lossis tsis ua haujlwm ntawm PCR.Qhov kub zoo sib xws ntawm cov cua sov thaiv kuj tseem ceeb heev kom tau txais cov txiaj ntsig PCR txhim khu kev qha thiab rov tsim dua tshiab.

Ib txoj hauv kev los xyuas kom meej qhov tseeb ntawm thermal yog sim nquag siv cov khoom siv ntsuas kub thiab rov ntsuas dua raws li qhov xav tau los ntawm tus kws tshaj lij.Kev ntsuas ntsuas kub feem ntau yog siv rau:

Zoo-rau-zoo raug txheeb ze rau qhov kub thiab txias hauv isothermal hom

Zoo-rau-zoo raug txheeb ze rau qhov kub thiab txias tom qab hloov dua siab tshiab

Thaum tshav kub kub qhov kub qhov tseeb

Primer Annealing Temperature Control

Kev tswj qhov kub thiab txias yog qhov ua haujlwm ntawm PCR ntsuas uas pab txhawb kev ua kom zoo ntawm primer annealing hauv PCR.Lub hom phiaj ntawm qhov kev teeb tsa gradient yog kom ua tiav qhov sib txawv ntawm qhov ntsuas kub ntawm cov modules, thiab los ntawm ≥2 ° C kub nce thiab poob ntawm txhua kem, sib txawv kub tuaj yeem kuaj ib txhij kom tau txais qhov zoo tshaj plaws primer annealing kub.Raws li txoj cai, qhov tseeb gradient ua tiav qhov kub thiab txias ntawm cov modules.

Txawm li cas los xij, cov pa hluav taws xob gradient thermal cyclers feem ntau siv ib qho kev thaiv thermal thiab tswj qhov kub ntawm ob lub cua sov thiab cua txias nyob rau ntawm ob qho kawg, feem ntau ua rau muaj kev txwv hauv qab no:

Tsuas yog ob qhov ntsuas kub tuaj yeem teeb tsa: qhov siab thiab qis kub rau primer annealing yog teem rau ntawm ob qho kawg ntawm thermal module, thiab qhov tseeb qhov chaw ntawm lwm qhov kub tsis tuaj yeem ua tiav ntawm cov qauv.

Vim yog qhov sib pauv cua sov ntawm cov kab sib txawv, qhov kub thiab txias ntawm thaj chaw sib txawv ntawm lub module feem ntau yuav ua raws li qhov nkhaus sigmoidal es tsis yog qhov tseeb linear gradient.

Qauv ntsuas kub

Lub peev xwm ntawm thermal cycler tswj cov qauv ntsuas kub yog qhov tseem ceeb heev rau qhov tseeb ntawm PCR cov txiaj ntsig.Cov cuab yeej tshwj xeeb tsis xws li tus nqi ramp, tuav lub sijhawm, thiab algorithms yog qhov tseem ceeb rau kev kwv yees tus qauv ntsuas kub.

Tus nqi ntawm cov cua sov thiab cua txias ntawm lub tshuab PCR txhais tau hais tias qhov kub thiab txias hloov ntawm PCR cov kauj ruam uas tshwm sim dhau ib lub sijhawm.Txij li thaum nws yuav siv sij hawm ib tug npaum li cas ntawm lub sij hawm rau lub tshav kub hloov ntawm lub module mus rau cov qauv, qhov tseeb cua sov thiab txias tus nqi ntawm cov qauv yuav qeeb.Yog li ntawd, lub ntsiab lus ntawm qhov kub thiab txias hloov ceev yuav tsum tau paub qhov txawv thiab to taub.

Qhov siab tshaj plaws lossis ncov module ramp tus nqi nruab nrab yog qhov hloov pauv ceev tshaj plaws uas lub module tuaj yeem ua tiav nyob rau lub sijhawm me me ntawm lub sijhawm thaum lub ramp.

Qhov nruab nrab block ramp tus nqi sawv cev rau tus nqi ntawm qhov kub thiab txias hloov nyob rau lub sij hawm ntev thiab yuav muab ib tug ntau tus neeg sawv cev ntsuas ntawm PCR tshuab ceev.

Qhov siab tshaj plaws qauv cua sov thiab cua txias npaum li cas thiab qhov nruab nrab cov qauv cua sov thiab cua txias tus nqi qhia txog qhov tseeb kub tau los ntawm cov qauv.Tus nqi ntawm cov qauv cua sov thiab cua txias yuav muab qhov kev sib piv ntawm qhov kev ua tau zoo ntawm PCR tshuab thiab nws qhov cuam tshuam rau PCR cov txiaj ntsig.

Thaum ua qhov hloov pauv hloov, nws raug nquahu kom siv cov cuab yeej nrog qhov kev pab cuam ramp uas simulates hom yav dhau los kom hloov tau yooj yim dua thiab cuam tshuam tsawg kawg ntawm PCR rov ua dua.

Lub thermal cycler yuav tsum tau tsim los rau lub sij hawm cov kauj ruam tsuas yog tom qab tus qauv ncav cuag qhov kub thiab txias.Nyob rau hauv txoj kev no, lub sij hawm uas tus qauv khaws cia ntawm qhov kub thiab txias yuav raug tswj xyuas ntau dua nrog cov xwm txheej sib thooj uas yuav tsum tau ua hauv cov txheej txheem khiav haujlwm.

Thermal cyclers feem ntau siv cov lej ua lej nyuaj los xyuas kom meej tias cov qauv tuaj yeem ncav cuag qhov kub thiab txias raws li qhov kev pab cuam preset.Raws li qhov ntim ntawm cov tshuaj tiv thaiv kab mob thiab cov tuab ntawm PCR plastics siv, lub algorithm tuaj yeem kwv yees qhov ntsuas kub ntawm cov qauv thiab lub sijhawm nws yuav siv mus txog qhov ntsuas kub.Kev cia siab rau cov algorithms no, thaum lub sij hawm cua sov los yog cua txias txheej txheem ntawm lub thermal cycler, qhov thaiv qhov kub yuav feem ntau tshaj cov nqi teev los ntawm tus txheej txheem hu ua thermal block overshoot los yog undershoot.Xws li kev teeb tsa ua kom cov qauv nce mus txog qhov kub thiab txias kom sai li sai tau yam tsis muaj overshooting lossis undershooting nws tus kheej.

Kev sim hla dhau

Cov yam tseem ceeb uas tuaj yeem ua rau kom muaj kev sib tw ntawm lub tshuab hluav taws xob muaj xws li cov nqi ramp, thermal block configurations, thiab kev koom ua ke ntawm automation platforms.

Qhov cua sov thiab cua txias ntawm lub thermal cycler nruab nrab yog qhov ceev ntawm qhov nws ncav cuag qhov kub thiab txias.Qhov kub nce thiab poob sai dua, PCR yuav khiav sai dua, uas txhais tau hais tias kev sim ntau dua tuaj yeem ua tiav hauv lub sijhawm.Tsis tas li ntawd, kev sim tuaj yeem ua kom nrawm dua los ntawm kev siv DNA polymerases sai dua.

Kev tsim ntawm thermal cycler module kuj tseem ceeb heev rau kev sim PCR.Piv txwv li, cov qauv hloov pauv tau tso cai hloov pauv ntawm tus lej ntawm cov qauv ib zaug.Tsis tas li ntawd, cov khoom siv cua sov nrog ib tus zuj zus tuaj yeem tswj tau yog qhov zoo tagnrho rau kev khiav haujlwm PCR sib txawv ib txhij ntawm ib lub thermal cycler.

Rau automated high-throughput PCR, software uas tswj cov pipetting tuav system yuav tsum programmable thiab sib xws.Cov tshuab tsis siv neeg yog qhov zoo tshaj plaws rau kev ua haujlwm siab dhau los ntawm PCR cov tshuaj tiv thaiv vim tias lawv tuaj yeem ua haujlwm tsis tu ncua nrog kev cuam tshuam tib neeg me me, yog li txo lub sijhawm xav tau rau kev teeb tsa kev sim thiab nce cov kev cuam tshuam hauv lub sijhawm.

Kev ntseeg tau, Durability thiab Kev Pov Hwm Zoo ntawm Cov Cyclers Thermal

Ntxiv nrog rau kev ua tau zoo thiab kev muaj peev xwm dhau los, lub tshuab PCR kuj tseem tuaj yeem tiv taus qee qhov kev siv rov ua dua, kev ntxhov siab ib puag ncig, thiab kev xa khoom.Qee cov tuam txhab lag luam tuaj yeem tshaj tawm txog qhov ntsuas ntsuas ua li cas kev ntseeg siab thiab kev sim ua haujlwm ntev.Qhov sib thooj PCR ntsuas ntsuas suav nrog:

Kev ntseeg tau: Cov cuab yeej siv tshuab yog siv los ua qhov kev sim rov ua dua ntawm cov cuab yeej siv nquag siv xws li lub hau thermal, tswj vaj huam sib luag / touchscreens, thiab cov khoom siv hluav taws xob kub.

Ambient siab: Ib puag ncig cov chav tuaj yeem siv los sim ua cov xwm txheej sib txawv ntawm kev sim niaj hnub, xws li kub, av noo.

Shipping Testing: Kev ntsuas kev poob siab thiab kev vibration tuaj yeem ua tau raws li International Safety Shipping Association cov qauv kom ntseeg tau tias cov cuab yeej tuaj yeem tuaj yeem ua haujlwm tsis zoo.

Warranty thiab kev pabcuam rau kev tswj xyuas lub tshuab PCR

Txawm hais tias muaj kev ntseeg siab nruj thiab kev sim ua haujlwm ntev, thermal cyclers inevitably muaj teeb meem kev siv lub neej ntawm cov cuab yeej.Rau kev thaj yeeb ntawm lub siab, cov chaw tsim khoom warranty, kev pabcuam, thiab kev saib xyuas yuav tsum tau txiav txim siab thaum yuav khoom siv.

Kev hloov pauv ntawm cov kev pabcuam xws li kev saib xyuas ntawm qhov chaw / rov qab mus rau lub Hoobkas, kev saib xyuas cov chaw taws teeb, thiab cov cuab yeej hloov pauv hauv cov txheej txheem txij nkawm, thiab lwm yam, kom txo tau qhov cuam tshuam ntawm kev ua haujlwm.

Qhov ntev ntawm lub sijhawm lav, lub sijhawm hloov pauv ntawm kev pabcuam, kev siv tau ntawm kev txhawb nqa kev pabcuam, thiab kev txawj ntawm cov neeg ua haujlwm pabcuam.

Kev ua tau zoo ntawm cov cuab yeej kev teeb tsa, kev ua haujlwm, kev koom tes, thiab kev txheeb xyuas kom ua tau raws li kev soj ntsuam thiab cov kev cai tswj hwm.Cov kev pabcuam tu xws li kev ntsuas qhov kub thiab txias, ntsuas, thiab ntsuas ntsuas yog muaj los xyuas kom meej tias cov cuab yeej ua haujlwm tau zoo nrog rau qhov sib thooj.

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